【用途】 猪圆环病毒病ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中圆环病毒抗体。 【简介】 试剂盒由抗原包被的微孔板，酶标羊抗猪IgG及其它试剂制成，应用间接ELISA原理检测猪血清中抗Ⅱ型圆环病毒ORF2蛋白的抗体。 【原理】 本试剂盒是采用猪Ⅱ型圆环病毒区ORF2合成肽抗原包被微孔板，在试验中，按操作步骤加入对照血清和待检血清，经温育后，若样品中含有猪Ⅱ型圆环病毒特异性抗体，则将与微孔板上抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后；再加入酶标二抗，与微孔板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶结合物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，加入HF溶液中止反应后，用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD值。 【试剂盒主要成分】 1． 包被抗原的微孔板 2块 （96孔） 2． 阴（绿盖）、阳（红盖）性对照血清 各1管 （1ml/管） 3． 抗猪IgG-HRP结合物 （黄盖） 1瓶 （22ml/瓶） 4． 20倍浓缩洗涤液（白盖） 1瓶 （30ml/瓶） 5． 底物A（紫盖）液、B液（黄盖） 各1瓶 （12ml/瓶） 6． 终止液（蓝盖） 1瓶 （12ml/瓶） 7． 样品稀释液 （透明盖） 1瓶 （50ml/瓶） 【用前准备】 仔细阅读说明书，所有试剂在4℃条件下保存，禁止结冰，如果干燥袋发红不能使用，不用的孔必须密封好以防潮湿对平板有害，不要使平板接触强光和氧化物。不要使用过期的成分或混合使用成分。注意加样和冲洗，以确保试验的度和准确度。操作过程中注意安全，要使用手套，终止液含有氢氟酸使用要小心。所有的废液要经过处理和净化。 本品为兽用产品。 【未提供的需用材料】 微量加样器、加液槽、蒸馏水、恒温箱、酶标仪、吸水纸 【注意事项】 1、试剂盒使用前各试剂应平衡至室温。 2、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用。 3、注意防止试剂盒各组分受污染。 4、微孔板拆封后避免受潮或沾水（每次将剩余的微孔板用封口袋扎紧后尽快置于4℃）。 【试剂配制】 洗涤液：用蒸馏水稀释20倍浓缩洗涤液，混匀。 【操作步骤】 1、 取预包被的微孔板（根据样品多少，可拆开分次使用），用样品稀释液将待检样品40倍稀释后加入板孔中，每孔加100μl。阴、阳性对照各设2孔，每孔100μl。另设一空白对照孔，空白对照孔加100μl稀释液。轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37℃温育30min。 2、 甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗板3次，300μl/孔，每次静置3分钟倒掉，zui后一次在不掉屑干净吸水纸上拍干。 3、 每孔加酶标二抗（抗猪IgG-HRP结合物）100μl，置37℃温育30min。 4、 洗涤3次, 方法同2。 5、 每孔加底物A液、B液各1滴（50μl），混匀，室温（20-25℃）避光显色10min。 6、 每孔加终止液1滴（50μl），10分钟内测定结果。 【结果判定】 以空白孔调零，在酶标仪上测各孔OD630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630值大于或等于0.4，阴性对照孔平均OD630值必须小于0.2。 样品OD630值大于0.4，判为阳性；样品OD630值在0.2到0.4之间，判为可疑；样品OD630值小于0.2，判为阴性。 【规格】 96孔×2块 【有效期】6个月 【贮存】 2-8℃避光保存 【生产日期】见试剂盒外包装 提示：酶标板真空包装袋若有漏气，酶标板仍然正常有效，不影响实验结果，请放心使用。 |
